奥林巴斯 CKX53 显微镜在细胞培养分析观察中应用广泛,以下从观察前准备、观察内容及要点、结果分析等方面进行介绍:
奥林巴斯CKX53显微镜观察前准备
细胞培养:根据细胞类型选择合适的培养基和培养条件,如贴壁细胞需使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基,在 37℃、5% CO₂的培养箱中培养,确保细胞处于良好的生长状态。
耗材准备:准备好细胞培养瓶、培养皿、盖玻片等耗材,确保其无菌且无杂质,避免对细胞观察造成干扰。
显微镜调试:打开显微镜电源,预热 15 - 30 分钟,使光源稳定。调整光源强度至合适水平,将物镜转至低倍镜(如 4x),调节焦距,使载物台处于合适位置,准备放置样本。
奥林巴斯CKX53显微镜观察内容及要点
细胞形态
整体形态:在低倍镜下观察细胞的整体形态,判断细胞是圆形、梭形、多边形等,例如成纤维细胞多呈梭形,上皮细胞多为多边形。
细胞边界:观察细胞边界是否清晰,清晰的边界表明细胞状态良好,若边界模糊,可能存在细胞损伤或病变。
细胞突起:某些细胞如神经细胞会有突起,注意观察突起的数量、长度和形态,若突起减少或形态异常,可能提示细胞功能异常。
细胞生长状态
细胞密度:通过低倍镜观察细胞在培养皿或培养瓶中的密度,判断细胞是否生长至汇合状态,一般细胞汇合度达到 80% - 90% 时需要进行传代。
细胞分裂:在高倍镜下观察细胞是否处于分裂期,注意分裂相的形态和数量,正常细胞分裂相形态规则,若出现异常分裂相,如多极分裂等,可能是细胞发生了癌变等异常情况。
细胞凋亡:观察细胞是否有凋亡特征,如细胞皱缩、核染色质凝聚、出现凋亡小体等,例如用 DAPI 染色后,在荧光显微镜下可清晰观察到凋亡细胞的核染色质凝聚现象。
细胞内部结构
细胞核:观察细胞核的形态、大小和位置,正常细胞核呈圆形或椭圆形,位于细胞中央。若细胞核形态不规则、出现核畸形等,可能与细胞病变有关。
细胞质:注意细胞质的颜色、透明度和有无颗粒等,如细胞质中出现空泡,可能是细胞受到损伤或代谢异常。
细胞器:在高倍镜或油镜下,可观察到一些细胞器的形态和分布,如线粒体呈棒状或粒状,若线粒体肿胀、变形,可能影响细胞的能量代谢。
奥林巴斯CKX53显微镜结果分析
细胞生长曲线绘制:通过定期观察细胞密度,以时间为横坐标,细胞密度为纵坐标,绘制细胞生长曲线,了解细胞的生长速率、对数生长期和平台期等,评估细胞的生长状态和增殖能力。
细胞活力计算:采用台盼蓝染色法等,计算活细胞和死细胞的比例,评估细胞活力。正常细胞活力应在 90% 以上,若细胞活力过低,可能是培养条件不合适或细胞受到了损伤。
异常细胞分析:对观察到的异常细胞,如形态异常、生长异常的细胞,结合细胞培养条件和实验目的,分析可能的原因,如是否受到污染、药物处理是否产生毒性等,必要时进行进一步的检测和验证。