奥林巴斯CX33暗场显微镜在观察菌丝孢子方面具有较高的分辨率和对比度,能够清晰地显示菌丝和孢子的形态结构。以下是一个使用奥林巴斯CX33暗场显微镜进行菌丝孢子观察实验的详细步骤:
一、奥林巴斯CX33实验准备
显微镜调试:
将奥林巴斯CX33显微镜放置在平稳、光线适宜的实验台上,确保台面稳固且无震动。
连接显微镜的电源适配器,并打开电源开关,等待光源稳定亮起。
根据观察需求,转动物镜转换器,选择合适倍数的物镜。通常从低倍物镜开始观察,以便找到样品并确定观察区域。
调节双目镜筒的间距,使其与自己双眼的间距相适应,以获得舒适、清晰的双目视觉效果。
若发现双眼看到的图像有差异,可分别调节双目镜筒上的屈光度调节环,使双眼都能清晰地看到图像。
暗场装置安装:
在聚光镜位置安装暗场聚光镜,并调节其光圈和孔径光阑,以获得最佳的暗场观察效果。
样本制备:
从培养好的真菌平板上,用接种环或镊子挑取少量带有菌丝和孢子的真菌样本。
在载玻片中央滴一滴蒸馏水或生理盐水,将挑取的菌丝孢子样本放入水滴中,用解剖针或镊子将菌丝尽量分散开,避免菌丝相互缠绕。
盖上盖玻片,注意避免产生气泡。
二、奥林巴斯CX33观察步骤
放置样本:
将制备好的样本载玻片放置在载物台上,并用玻片夹固定好。
确保样本位于载物台通光孔的中心位置,以便光线能够充分透过样本。
对焦与观察:
通过调节粗调焦旋钮,使载物台缓慢上升或下降,同时从侧面观察物镜与样本玻片之间的距离,直到物镜接近样本但不要接触到玻片。
通过目镜观察,继续调节粗调焦旋钮,使载物台下降,直到能够看到样本的大致图像。
使用微调焦旋钮进行精细调节,使图像达到最清晰的状态。
暗场观察:
在低倍镜下,移动载物台,寻找样本分布均匀、图像清晰的区域。
切换到高倍物镜,进一步观察菌丝孢子的形态、大小、排列方式等特征。
在暗场观察模式下,由于只有散射光能够进入物镜,因此可以清晰地观察到菌丝孢子边缘的对比度增强效果。
三、奥林巴斯CX33注意事项
样本制备:确保样本的纯净性和代表性,避免杂质干扰观察。同时,样本的固定和染色步骤也需严格按照操作规程进行(对于暗场观察,通常不需要染色)。
显微镜调试:在观察前务必对显微镜进行调试,确保各个部件正常工作,镜头清洁无污渍。此外,还需根据样本的特性和观察需求调节光源亮度和聚光镜光圈大小。
操作规范:在操作过程中,要遵循无菌操作和实验室安全规范,避免交叉感染和实验室事故的发生。
记录与分析:在观察过程中,可以使用显微镜自带的数码摄像头将观察到的图像实时记录并保存在计算机中,以便后续的分析和比较。
通过以上步骤,使用奥林巴斯CX33暗场显微镜可以清晰地观察到菌丝孢子的形态结构,为真菌学研究提供有力支持。