奥林巴斯CKX53样本处理方面
细胞培养与固定:若观察培养细胞,要确保细胞状态良好且密度适中,避免细胞过度生长或重叠。固定细胞时,严格控制固定剂浓度和时间,如使用 4% 多聚甲醛固定 20 - 30 分钟,防止过度固定导致细胞形态改变或抗原性丢失。
染色技巧:对于不同细胞结构和成分,选择合适染色方法。如用苏木精染细胞核呈蓝色,伊红染细胞质呈红色,便于区分细胞结构。染色时注意染液浓度和染色时间,可先进行预实验确定最佳条件,染色后充分水洗,去除多余染液,避免背景干扰。
奥林巴斯CKX53显微镜操作方面
光源调节:根据样本特性和观察需求调节光源强度与色温。观察较薄或透明细胞,降低光源强度,避免光线过强影响对比度;观察有颜色或不透明细胞,适当增加光源强度。可调节显微镜的色温调节旋钮,使图像色彩更真实。
聚焦技巧:先使用低倍镜粗调找到细胞大致位置,再换高倍镜微调。调焦时,从侧面观察物镜与载玻片距离,避免物镜压碎玻片。使用细准焦螺旋缓慢调节,找到清晰图像,可小幅度上下移动载物台,观察细胞不同层面结构。
物镜使用:定期清洁物镜,特别是高倍物镜,用擦镜纸蘸取少量镜头清洁液擦拭。不同物镜有不同工作距离和数值孔径,切换物镜时注意调整,如从低倍镜换高倍镜,因高倍镜工作距离短,需小心操作,防止物镜碰撞样本。
奥林巴斯CKX53观察与分析方面
多视野观察:不要局限于一个视野,移动载玻片观察多个视野,获取细胞整体分布和形态信息,避免因局部特殊情况得出错误结论。
对比观察:可同时观察未经处理和经过特定处理的细胞样本,对比细胞形态、结构变化,分析处理因素对细胞影响。也可对比不同细胞类型,加深对细胞特征理解。
记录与标注:及时记录观察到的细胞图像和现象,标注细胞结构、特征及观察条件,如物镜倍数、染色方法等,便于后续分析和查阅。